EB:EB(エチジウムブロマイド、ブロマイド)
臭化エチジウムは、アガロースおよびポリアクリルアミドゲルで DNA を観察するために使用される高感度の蛍光染色剤です。エチジウム ブロマイド アガロース ゲルで DNA を観察する最も一般的な方法は、DNA の蓄積された塩基間に埋め込むことができる三環式平面基を含む蛍光色素エチジウム ブロマイドでそれらを染色することです。
臭化エチジウムは、発がん性の高い強力な変異原性物質です。それは 60-70 ° C で蒸発します (したがって、接着剤が熱すぎる場合は添加しないことをお勧めします。または、0.5ug/ml の液体に添加して 30 分間染色する必要があります) (過剰な EB が発生した場合加えて、染色されたゲルを室温で20分間水に浸して、結合していないEBによって引き起こされるバックグラウンド蛍光を減らすこともできます)。
臭化エチジウム溶液の精製処理:臭化エチジウムには一定の毒性があるため、実験終了後、EBを含む溶液を精製して廃棄し、環境汚染や人間の健康への害を避ける必要があります。
(1) EB 含有量が 0.5mg/ml を超える溶液の場合、次のように処理できます。
① EB 溶液を水で 0.5mg/ml 未満の濃度に希釈します。
② 0.5mol/L KMnO4 を加えてよく混ぜ、25mol/L HCl を等量加えてよく混ぜ、室温で数時間放置する。
③ 2.5mol/L NaOH を 1 倍量加え、よく混ぜて捨てる。
(2) EB 含有量が 0.5mg/ml 未満の溶液は、次のように処理できます。
①1mg/mlの用量で活性炭を加え、時々穏やかに振り混ぜ、室温で1時間置く。
②濾紙で濾し、活性炭を濾紙で密閉して廃棄する。